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藏酷牛人工授精技术
作者:姜海刚    文章来源:本站原创 2008-11-23    点击数:2183    更新时间:2009-11-5

                                                   前言

用人工授精代替公牛本交,能大幅度减少公牛数量。将公牛犊实行二年育肥出栏,大幅度缩短饲养周期,能够减轻青藏草原超载过牧的压力。用内蒙西门塔尔和大通野血牦牛双父本杂交,能提高牦牛的出栏率、商品率,提高牦牛肉、乳产量和品质,能提升牦牛产品价值,能提高牧民收入。在牦牛繁育生产中,推广冻精冷配人工授精十分关键。

冷冻精液人工授精,在肉牛行业已是成熟技术,在全世界得到广泛的应用,使得全球的优秀肉牛种子,得到高强度大范围的利用。使用冷冻精液,推广普及人工授精技术,充分地利用了国内外先进种公牛资源,实行拿来主义,实现资源共享。由于杂种公牛雄性不育,牧民放弃饲养本交公牛,必须采取人工授精技术,不论西门塔尔,还是野血牦牛,都需要使用商品冻精进行冷配。因此,成功地在牧民中推广普及人工授精技术是关键点,在各级政府的强力支持下,在基层建设人工授精站是突破口。
   

    第一节   牦牛的发情
   

    一、牦牛发情鉴定

在一昼夜里,母牦牛发情开始的时间,多在早晚凉爽的时候,6-9时的占46.7%19-22时的占26.7%。雨后阴天出现发情的较多。

1、外部观察法  

、发情初期,神态不安,放牧中采食减少,外阴轻微肿胀,阴道呈粉红色,阴门流出少量透明如水的黏液。喜爬跨别的母牦牛,喜与育成公牛追逐,但拒绝公牛爬跨;

、发情中期,一般出现在发情后10-15小时,外阴明显肿胀、湿润,阴门流出蛋白样黏液。表现极活跃的性冲动,举尾频尿或弓腰举尾。放牧时很少采食,主动寻找成年公牛,或成年公牛追逐不离,公牦牛爬跨时举尾、安静站立欲接受交配。此期为发情最盛期;
   

、发情末期,精神表现安定些,上述特征逐渐消失,神态、采食趋于正常,外阴肿胀消退,黏液变稠呈现出草黄色,黏液量少;

、发情后期,部分母牦牛阴道排出少量血液。据谢荣清报道(1992),情期发生流血的母牦牛占发情牛的47.8%(其中以青年母牛占的比例较大),占受胎牛的49.3%,受胎率为47.6%,欲同期受配母牦牛的受胎率相同。一般发情母牦牛阴道排血出现在发情后1-4天,此时不宜在交配或人工输精,因血液对精子会产生凝集而影响运行。

 

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 2、直肠检查法

此方法主要根据卵巢上卵泡的大小、质地(软、硬)等来判断发情程度。由于牛的发情期短,卵泡变化快,一般不易掌握。卵泡发育分为三期:

、卵泡出现期,有卵泡发育的一侧卵巢体积增大。卵巢上卵泡发育的地方为软化点,波动不明显。外部发情表现不明显;

、卵泡发育期,卵泡进一步发育,呈小球形,部分突出于卵巢表面,波动明显。外部发情表现明显;

、卵泡成熟期,卵泡体积增大卵泡液增多,泡壁变薄,紧张性增强,波动明显,直检时有一触即破之感。外部发情表现完全消失。
母牛大多数在发情表现消失后12-15小时排卵,在排卵前数小时,卵泡变软并有波动,这就是要排卵的信号。

    二、牦牛发情季节 

母牦牛的发情季节,是产区一年中牧草、气候最好的时期。多在7-11月份,以7-9月份为发情旺季。青海省大通牛场7-9月份的气温为6.9-13.9℃,雨量充足,牧草丰盛,牦牛的营养状况处于全年最好的季节,68.7%的适龄繁殖母牦牛发情。当年未产犊的干奶母牦牛,最早在625日就开始发情,而且多集中在7-8月份;当年产犊带犊挤奶的母牦牛,最早在95日开始发情,多集中在9-11月份。

据报道,母牦牛的发情季节随海拔的升高而推迟。在海拔1400米处母牦牛开始发情的时间为529日;2100-2400米处为610-15日;在3000-3800米处为625日;西藏那曲县门堆地区海拔4570米,7月初个别母牦牛才出现发情。

在发情季节内适龄繁殖母牦牛的发情率为50%-60%,依母牦牛体况、是否带犊、哺乳和挤奶的不同而不同。在青海大通牛场母牦牛的发情率为55.8%,其中干奶母牦牛为84.3%,当年产犊并挤奶的母牦牛仅为36.5%
    

三、发情持续周期

母牦牛发情持续期为16-56小时,平均32.2小时,比普通牛稍长。幼龄母牦牛发情持续期偏短,平均为23小时,成年母牦牛偏长,平均为36小时。气温高而无雨的天气(7月份平均气温14.2℃)时发情持续期延长;发情时遇雨天、阴天则变短。

母牦牛在发情终止后(不再跟随或接近公牦牛)约12小时(5-16小时)排卵。在人工授精时,必须注意观察,防止错过受精时机而不孕。为提高受胎率,应在发情开始后12小时输精1次,隔12小时后再输精1次。对此有几句顺口溜:牛发情,有特点,持续期,时间短,情终后,才排卵,配一次,不保险,配两次,隔半天

发情周期又叫性周期,指母牦牛出现发情,然后消失,如未交配或交配未孕,经过一定时间又发情或重复发情。母牦牛发情周期一般为21天。青海大通牛场母牦牛(观测53头)发情周期平均为22.8天;甘肃山丹马场母牦牛(308头)平均为20.1天;四川省红原县(1184头)为20.5天。

    第二节   人工受精技术

人工授精技术就是指用器械(假阴道)采取公牛的精液,再用器械(输精器)注入到发情母牛的生殖道内,以此来代替公母畜自然交配的一种科学配种方法。

一、参配母牦牛的组群和管理

参配母牦牛的组群时间,依据当地的生态条件而定,应在母牦牛、犏牛发情季节前1月内完成,并从母牦牛群中隔离公牦牛和公黄牛。

参配母牦牛、犏牛应选择体格大、健康结实的经产牛,最好是当年未产犊的干乳牛。参配母牦牛的数量应根据配种计划确定,一定要考虑到人工授精点的人力、物力条件。配种季节配1头母牦牛,平均需冷冻精液4-6支(粒)。

配种点应设在交通、水源方便,参配牛群较集中及放牧条件较好的地区。配种操作室或帐篷应与食宿帐篷分开。

参配牛群最好集中放牧,及早抓膘,促进早发情配种和提高受胎率,也便于管理。参配牛群应选择有经验、认真负责的放牧员放牧及准确观察和牵拉发情母牦牛。产过种间杂种的母牦牛群,使其相对固定为参配牛群除每年整群进行必要的淘汰、补充外,最好不要有大的变动,因为这些牛一般受胎率较高,具有对人工授精操作的条件反射,容易开展工作或减少捉拉牛、输精等方面的劳力及事故。
   

一个输精点或一些牛群,最好用一个品种的冻精配种,以便于以后杂种牛的交叉杂交、测定杂交效果,防止近亲交配。既便于配种管理,而且可以形成商品生产优势和更好的组织饲养管理工作。

冷冻精液配种的时间不宜拖的过长,一般在70天左右完成。在此期间要严格防止公牦牛混入参配牛群中配种(夜牧也要有人跟群放牧)。人工授精结束后,放入公牦牛补配零星发情的牦牛,提高经济效益。

二、液氮容器的保养和维护

1、液氮容器(或液氮罐)内部得洗涤与干燥  

液氮罐在使用过程中,罐内会逐渐积水、杂菌繁殖,也有精液落入,有时会出现  现象,降低使用期或发生事故。因此,每年必须洗清、干燥内部1-2次。具体做法为:从容器内取出提筒(将冷冻精液移入另一个容器内),倒出液氮放置48小时,使内部温度回升到0℃左右;用40℃-50℃温水(禁止水温在60℃以上)配以中性去垢剂,注入容器内,然后用软布擦洗;用清水冲洗,倒置于木架上,使其自然风干备用。容器无论盛液氮与否均不得在日光下暴晒、置于火炉旁或炕头边;风干得容器(或新购买的容器)盛液氮时,先用少量液氮对容器进行预冷,要让容器内蒸发得氮气顺利排出,然后注入液氮。    

2、使用中不能碰撞、倾倒   

液氮容器内、外壳之间存在着真空夹层,内胆经常处于向外得大气压力下,外壳则相反。这种压力是很大的,容器虽有一定的强度,但使用过程中要十分小心,切不可碰撞、冲击,使容器凹陷、损伤、轻者可能降低性能,重则报废。为防止碰撞,要加厚软得外套保护。草原上用驮牛(阉牦牛)驮运容器时,最好放在专门得木箱里并用塑料或干草垫好。

使用绕性软管往容器中注入液氮、装入提筒及盖塞时,要十分小心操作防止弄伤颈管。如果操作粗暴,造成盖塞损伤严重,会增加液氮蒸发损失或不能固定提筒位置致使盖塞从粘结处脱落。
   

三、冷冻精液的提取验收、运输和贮存

1、冷冻精液的提取和验收 

输精点及时向提供冻精的单位(或种公牛站、冻精站)提取有关品种公牛的冻精分别按品种、公牛号、制作日期、批号等,分装入液氮容器的提筒内,并分别记牢标签,以免发生错乱。供冻精的单位应填写冻精出售单据,写明上述公牛号和数量(或支数)及冻精的质量指标或标准,必要时进行活力检查。
   

2、液氮容器或冻精的运输和贮存   

无论用何种运输工具运输液氮容器,要加外套毛垫或胶垫要用袋子结实固定。车辆运行要平稳,尽量减少颠簸,防止倾倒或碰撞。

贮存冻精的液氮容器,应放在阴凉且距火炉较远的地方,由专人管理。液氮减至容器的1/3时应补充液氮。减量程度能开盖看出(用手电筒照明,但为了减少开盖次数应给每一容器贴上重量表,每隔3-5天称重一次,并做好消耗记录,以便及时补充液氮。

从液氮容器中提取冻精要迅速,动作要轻和稳妥,存放冻精的提筒提出或放入不可用力过强。颗粒或0.5毫升细管冻精,在容器外停留不可超过5秒钟,如向另一容器中转移、分装等需时间较长时,应在广口液氮容器中浸泡加处理,否则会严重影响冻精质量。
   

四、冷冻精液的解冻

冻精解冻操作应在帐篷或室内进行,不允许在露天或圈地上操作,要经常保持帐篷内或室内的卫生,操作时严禁吸烟、生活炉等防止烟、尘污染或危害精液。工作人员要清洗、消毒双手,穿清洁的工作服。

解冻需两人协作,一人加温解冻液,另一人从液氮罐中去冻精。取一支或数支经灭菌的玻璃试管(或盛过青霉素的小瓶),按发情配种母牦牛头数计量注入解冻液(2毫升、头)。再将加解冻液后的试管或小瓶,浸入事先准备好的盛有开水的烧杯或瓷杯内加温(注意开水不的淹过试管或小瓶口),用温度计测量试管内稀释液温度至38-40℃时,立即用竹夹子或金属无钩镊子(在液氮罐口先预冷数分钟),取出所需的冻精颗粒,投入到解冻液中,摇动数秒钟使其迅速解冻,然后快速进行活力检查,精子活力在0.3以上,即可用于输精。
   

五、输精工作

1、发情母牦牛的保定

套捉、牵拉发情母牦牛进入保定架内输精费时费力,有些性野的母牦牛4个强劳力协同牵、赶,仍难以进入保定架,有的鼻镜系绳或用牛鼻钳时,甚至扯断鼻镜而逃(有的地域牧户喜欢把牛栓系,输精时,把牛的前双蹄绑牢,后有抓尾巴,即可输精)。发情母牦牛牵入保定架后,要栓系和保定好头部,左右两侧(后躯)各有一人保定,防止牛后躯摆动。保定不当或疏忽大意,容易出事故。保定稳妥后方可输精。

草原上使用的配种保定架,以实用、结实和搬迁方便为好。以四柱栏比较安全和操作方便。栏柱埋于地下约70厘米左右。
   

2、输精  

输精前要准备好各种用品,如经洗涤、消毒、干燥的输精枪、套管、纱布、水桶、肥皂、毛巾等。

将解冻精液按输精计量吸入输精管。为避免高原强紫外线、寒冷天气等对精子的危害,将稀有精液的输精管用纱布包好,置于牛用假阴道内,在橡胶内胎夹层加25℃的温水保温,或制一输精管保温箱,箱为两层下层制一热水袋,加温水保温,上层放输精管,在临输精前现场取用。

输精员要将手指甲剪短磨光,手臂洗净、消毒,戴好长臂乳胶手套、穿工作服、长筒靴、围裙等,以防人畜共患病传染。

要求输精计量准确(冻精颗粒1粒或冻精吸管1支、解冻液2毫升)、冻精质量合格。输精要适时,每一情期输精2次,以早、晚输精为好。
采用直肠把握子宫颈输精法,做到慢插、适深、轻注、缓出,防止精液逆流。

输精员用手(一般用右手)轻轻刺激牦牛肛门排粪,然后伸入肛门掏直肠宿粪后,另一人用清水冲洗肛门和阴门,并用生理盐水冲洗。输精员用没伸过直肠、干净的手持输精器由阴门插入,先向上斜插,避开尿道口,然后平插至子宫劲口。同时伸入直肠的手指隔直肠壁把握子宫并稍提持平(母牦牛的子宫颈比普通牛的短,一般长约5厘米,有软骨性感触),此时两手协同动作,通过感触,两手配合将输精器慢慢插入子宫颈口内(子宫颈内壁一般有三个子宫颈环,每一环上都有大小不等的紧缩皱襞),将精液注入子宫内然后抽出输精器,再用伸入直肠中的手按摩一下子宫,刺激子宫收缩,将手抽出。

牦牛子宫颈距阴门近(阴门距子宫颈外口的长度为22.5厘米),子宫颈壁硬,子宫在骨盆腔内的流动幅度小,通过直肠较易把握住子宫颈,但子宫颈内壁有明显的3个子宫颈环,环上特别是外环,皱襞多、细小且紧缩。直肠把握子宫颈输精时,向子宫颈插入输精器比较困难,一定要细心、缓慢,以免刺破出血影响受胎率或导致炎症等。
   
给母牦牛输精的过程中,工作人员要密切配合,特别要注意安全,严防人、畜受伤,或输精器折断于母牦牛阴道或子宫内等事故。输精后要仔细进行输精受配母牦牛的登记及器械、用具的清洗和消毒工作。

    第三节   提高牦牛发情率的措施

在高山草原生态环境条件下,适龄繁殖母牦牛并不全部发情,发情配种之后不能全部受胎,受胎母牦牛不能全产犊,所产犊牛难以全活,因此,母牦牛的繁殖成活率也受到了限制。分析母牦牛在繁殖过程中的各个环节及影响繁殖成活率的各项指标,有发情率、受胎率、产犊率和犊牛成活率4项。在这4项指标中,影响最大的是母牦牛的发情率。不仅是因为发情率在4项指标中比较低,关键是发情率是最基本的指标。它在提高繁活中起到主导作用。母牦牛和犏牛中,发情率最低的是当年产犊哺乳兼挤奶的母牦牛,这类牛也是提高发情率的重点。如果将其发情率提高到干奶母牦牛的水平,则整个牛群的繁活率就会提高一倍左右。
   

一、加强放牧管理和冷季补饲

加强放牧管理及冷季补饲,使母牦牛维持适当的膘情,是保证母牦牛正常发情的前提。此外,在进入冷季后,对老、弱、生殖系统有病和两年以上未繁殖(包括连续流产)的母牦牛应清理淘汰,以节约补饲草料。对以妊娠带犊的母牦牛,要打破传统的不断奶的习惯,使妊娠母牦牛在分娩前干奶(或断奶)。当年产犊的母牦牛,对膘情差、犊牛发育弱、奶量少、不挤奶,抓膘复壮,使其能尽早发情,对四月份前产犊的母牦牛,一般不立即挤奶,待采食上青草后再挤奶。暖季采取不栓系,早挤奶,早出牧,夜撒牛(放牧)的措施,促其早复壮、早发情。发情配种有条件的地区,还可从当地兽医站购药物催情或采取同期发情处理。
   

二、对母牦牛实施同期发情

对母牦牛发情周期进行同期化处理得方法叫同期发情。它是利用某些激素制剂人为的控制并调整一群母牦牛的发情周期进程,使其在预定的时间内集中发情或排卵,并有计划的组织配种,缩短配种期,逐步调节产犊季节或使其相对集中产犊。不仅可以提高繁殖率,促进幼牦牛的生长发育,而且便于牦牛生产中冻精配种工作的组织和牛群饲牧管理工作。
   

1、孕激素埋植法

1)、装药小管得制备及灭菌
   
选用无刺激性得塑料细管或鸡羽根(内径2毫米),截成15-18毫米的短管,管壁用大针头烫刺20个小孔,并将短管的一端稍加热压成细缝,但不封住(鸡羽毛根用其自然形状)。小管装药前浸泡于70%得酒精中2-4小时灭菌,然后取出置于消毒纱布中吸去酒精待装药。
  

2)、装药及埋植

每只小管装药量依孕激素的种类不同而异。18甲炔诺酮装量为20-25毫克,一般混入等量得消炎粉,充分研细、混匀。用消毒镊子夹细管装药,按药量装入,不要挤压。最好在现场边装边埋植。
   

将母牦牛放倒绑定,头、劲保定牢靠。在牛耳正中下端剪毛并涂碘酒,用套管针(内径与埋植药管外径相一致)向耳根方向刺入皮下及耳软骨之间,深约25毫米(或比小管稍长),将小管放于套管内,小管开口向上,用直径相当的秃头细棒将小管插入或埋植于皮下,然后用手指在皮肤外面借接触感按压小管,同时抽出套管及细棒,用碘酒涂伤口。

3)注射药物

为提高同期发情的效果,在埋植药管的同时,可肌肉注射同一孕激素混悬液1毫升。

4)、取埋植药管

埋植10-12天后取管。取管时,仍将母牦牛放倒保定,用手术刀在药管开口端切一小口,并用手指挤出药管,不要用力过猛,以免将管内药物挤出,仍残留于皮下。

取出药管后,可肌内注射孕马血清促性腺激素500-800国际单位,或促卵泡2100微克,以提高催情效果。

5)、定时输精

取管后48小时,72小时,84小时各输精1次。或经发情检查后定时输精。
    

2、前列腺素注射法

分肌内注射和子宫颈注入(用输精导管直肠把握注入)两种。肌内注射操作简便,省力并效果较好,但用药量多;子宫颈注入用药量少,效果也明显。

用前列腺素(PGSPG)进行同期发情处理时,只有当母牦牛存在功能黄体时期才能产生发情反应。对新生黄体,前列腺素并无溶解作用。因此用前列腺素处理后,对有发情反应的即进行配种,无反应的需进行第二次处理。
   

3、孕激素阴道栓法

利用阴道栓处理牦牛同期发情,阴道栓是抑制牛发情的,使其处理牛群能同时发情,把阴道栓塞入阴道后叉向外展开,固定在阴道内。一定时间内取出,同时注射前列腺性激素,待观察发情,适时输精。

1)、放入阴道栓

根据牦牛往年的发情规律,确定放栓时间(各地不同,一般牦牛有个别的发情迹象就开始),放栓最好选择在上午进行。放栓的同时对母牦牛进行肌肉注射苯甲酸雌二醇0.1mg和黄体酮50mg类激素。

放入阴道栓后第7天进行撤栓,同时肌肉注射PG0.4mg,并给牦牛穿上裤衩,即裆布(防止公牦牛偷配)。放牧人员进行发情观察。
  

2)、人工输精

一般,肌注前列腺素类似物24-48小时后,牦牛就陆续开始发情,即放阴道栓后的第8-9天牦牛发情,观察发情后适时进行人工受精,最好次日补输1次。为提高受胎率,对第二个情期(17-21天)进行观察,如有牦牛再发情应及时进行补配。从而做到同期发情效果。其缺点是价格较贵。

    第四节  妊娠与分娩

    1、妊娠与分娩
   

牦牛的妊娠期一般为250-260天(怀公胎儿为260天,母胎儿为250天)。蔡立报道(1992),解剖观察38头母牦牛(其中妊娠1-4月的为17头)的生殖器官,发现孕于左侧子宫角的(11头,占64.7%)多于右子宫角(6头,占35.3%)孕角侧卵巢比空角侧卵巢明显增大,且表面有黄体而稍凸,孕角侧输卵管也明显变粗。

母牦牛母性行为很强,妊娠后期比较安静,一般逃避角斗,行动缓慢,放牧多落于群后。临近分娩时,喜离群在较远而僻静的地方产犊。当犊牛出生后,母牦牛舔净犊牛体表得黏液,经过10-15分钟犊牛就会站立(一般站不稳),并寻找哺乳。母牦牛发出一种依恋、温和的叫声,一直等犊牛哺乳安静后,母牦牛才能自己采食。刚产过犊的母牦牛,喜带犊牛离群游走,卧息于远处,一般不主动归群,放牧员如不及时发现赶回,夜间犊牛容易遭狼等兽害。大多数母牦牛在白天放牧过程中在草地上分娩,夜间分娩的较少。因难以接近助产,脐带一般自行扯断。难产很少。蔡立(1976-1981)在四川统计861头分娩母牦牛,难产率为3.3%,孪生率为0.5%

母牦牛在哺乳期间,具有很强的保护、照料犊牛的行为。同普通牛种母牛相比,母牦牛对犊牛的保护、占有行为强烈,特别是哺乳初期,如犊牛受生人或其他家畜的干扰时,母牦牛会挺身而出,保护防御反射或攻击人、畜。
   

2、产犊率

妊娠母牦牛的产犊率较高。西藏畜牧科学研究所统计妊娠母牦牛971头,产犊率为94.6%;四川向东牧场的产犊率为94.1%;青海大通牛场的产犊率为85.9%

妊娠母牦牛流产、死胎等终止妊娠的比例为5%-10%,很少有难产,生殖系统疾病也较少。但也不能忽视保胎工作。引起胎儿死亡、流产的原因较多,有体质和抵抗力(膘情、健康状况)弱的原因,也有机械性(拥挤、滑倒摔伤及殴打等)损伤和细菌性(布氏杆菌病、喂发霉饲料)侵染等原因。众多的因素中,内因是母牦牛的体质和抵抗力其他属外因,即外因只有通过内因才能起作用。因此,保胎或提高产犊率的关键是搞好妊娠母牦牛的饲养管理和增强其抵抗力。

本文内容除作者的实践体会与试验资料外,主要来源于:
张容昶、胡江《牦牛生产技术》金盾出版社20029
谨向原著作者与出版社表示感谢!  

 

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